毛細管超速離心技術(shù)

原理

根據(jù)細胞的密度差和沉降速度差進行分離，由于新鮮細胞和陳舊細胞的核質(zhì)比有一定的差異，最終導致細胞的密度有所不同，通過超速離心使不同密度的細胞進行層次分離，從而達到分離新、舊細胞的目的。

應(yīng)用

有效分離患者自身細胞和新近輸入的獻血員細胞，大大方便了大量輸血后患者紅細胞血型的準確定型和臨床輸血不良的回顧性調(diào)查。

對于新發(fā)的白血病患者可以白血病發(fā)病后細胞和發(fā)病前細胞進行分離，然后再分別進行血型定型，從而推測出患者患病前的準確血型。

患者直抗混合凝集應(yīng)用

同種抗體所結(jié)合的是供血者紅細胞，在病人發(fā)生免疫性溶血期間，輸入的供血者紅細胞其平均年齡一般比受血者的紅細胞為大。

通過分離，結(jié)合有抗體的供血者紅細胞大多沉至底層，由此顯示DAT 陽性程度的較大差別

材料

· 微量紅細胞比積管

· 砂輪

· 封口設(shè)備：優(yōu)質(zhì)橡皮泥

· 一次性塑料吸管或Tip頭

· （加樣槍）

· EDTA抗凝的全血標本

高速離心機示意圖

操作方法

將白膜層紅細胞用生理鹽水洗滌三次，最后一次1000×g離心5min，在不破壞白膜層的情況下，盡可能的去掉上清。

將洗滌后的白膜層紅細胞吸出后混合，加入1-2根比積管中，留出5mm長度封口用。

從血液加入端用橡皮泥將管底封死，擠出的血液用紗布吸走。

放入有編號（記錄編號與患者對應(yīng)）的離心槽中，注意平衡，擰緊內(nèi)蓋，關(guān)上離心機外蓋10000r/min，離心15-20min。

在距紅細胞柱頂（近心端）3mm處，切開比積管（或在另一端用橡皮泥擠出約3mm血液），將此段紅細胞洗入鹽水管中三洗。

三洗后的紅細胞配制成1%（微柱法）或3%（試管法），進行抗原鑒定。

注意事項

分離輸血后3天以上的標本較好分離

在24小時分離的年輕紅細胞中仍存在供血者的紅細胞。

在48小時，除非短時內(nèi)輸了大量血液，一般供血者的血型抗原可在分離的年輕紅細胞群中消失。

輸血后短時內(nèi)分離出自身紅細胞是可能的。

只對產(chǎn)生正常數(shù)量的網(wǎng)織紅患者有效

對不能產(chǎn)生正常網(wǎng)織紅細胞輸出血患者無效，典型再生障礙性貧血的輸血患者無效。

網(wǎng)織紅細胞減少表示骨髓造血功能減低，常見于再障、骨髓病性貧血。

在衰老的網(wǎng)織紅細胞某些抗原表達減弱

一些抗原不能很強的表現(xiàn)出來，尤其在檢測E、e、c、Fy 、Jk 和Ge抗原時特別注意；

網(wǎng)織紅細胞上D抗原位點數(shù)約為成熟紅細胞的60%。

盡量避免破壞白膜層

紅細胞壽命約為120天。一般而言，進入血循環(huán)中的紅細胞成為熟紅細胞，但也有一定比例的網(wǎng)織紅細胞。

網(wǎng)織紅細胞數(shù)量越多，其群體細胞的平均年齡越輕，反之則老。

盡量避免取到白細胞

· 白細胞直徑7~20μm左右

· 紅細胞7μm左右

· 過多白細胞造成假陽性